Préparation des acariens pour microscopie

[vincesap]

Une seule réponse positive me suffisant, d'accord, je m'y colle dès que j'ai un peu de temps (pas avant une semaine, je pense).

[leopold76]

Bonjour,
Olivier, as tu dejà eu des problèmes de bulles avec le PVLP ? Moi j'ai un énorme problème 90% de mes préparation sont HS
Je crois que je vais passer au Baume moi !

[olivier9099]

Oui c'est une question de qualité de PVLP. Où l'as-tu acheté ?
C'est le pb principal de ce médium, on ne peut être sûr de la qualité du médium (proportions et mode de préparation) qu'après deux ans. C'est limite alchimique, j'ai partagé cette réflexion avec des personnes du muséum. Avec le baume il n'y a pas de surprise en effet mais il faut aussi acheter un baume de qualité...

Grand principe : toujours tester un médium de montage avant de se lancer dans plein de montages...

Le meilleur PVLP que j'ai trouvé c'est Paul, notre spécialiste des tiques, qui le fabrique lui-même !!

[leopold76]

D'accord, je vais voir alors ! Merci beaucoup !
Je l'ai acheté auprès de Marcel sur son site avec les Champignons

[olivier9099]

Oui moi aussi j'en ai acheté chez Marcel mais j'ai déchanté après deux ans comme toi. Je n'ai pas eu le temps de lui en parler mais il faudrait qu'il revoit sa recette.
En attendant cela peut servir de média semi-permanent.

[leopold76]

D'accord, j'hésite à lui en parler de peur de le vexer mais bon... Le problème du baume c'est qu'il faut déshydrater. J'hésite encore entre un bon PVLP et Baume

[guillaume]

J'ai passé commande de Polyvinyl lactophenol chez Reactolab (Chroma). Je voulais le préparer moi-même mais le seul ingrédient qui me manque est le polyvinyl alcool qui est aussi cher que le PVLP au final...

Pour le problème d'apparition de bulles de Leopold peut être qu'en étanchéifiant la préparation avec du vernis autour de la lamelle on pourrait prévenir ce problème, puisque j'imagine qu'il est consécutif à une évaporation lente et une rétractation du milieu. Procédez-vous déjà comme ça?

[leopold76]

Je l'ai pourtant fait... J'ai bien lutté la lame pourtant !
Peut etre que j'avais aussi le mauvais vernis ?

[guillaume]

Je remonte ce sujet, pour dire donner mon impression du PLVP. Effectivement le fait qu'il soit compatible avec une préparation aqueuse est parfait.

Voilà comment j'ai procédé:
- je dépose les acariens sur la lame avec une goutte d'eau du milieu dans lequel ils sont (qui contient de l'acide lactique)
- j'absorbe comme je peux le liquide avec du papier absorbant sans toucher les acariens
- je dépose une goutte de PVLP directement sur les acariens
- je pose la lamelle du mieux que je peux (les acariens ont tendance à partir en périphérie de la lamelle, ils ne restent jamais au centre, je ne sais pas si c'est pareil pour vous???)

Voilà le résultat: https://www.galerie-insecte.org/galerie ... ref=160498

Ce qui me dérange c'est la présence de nombreuses bulles dans le corps de l'acarien, lipidiques ou aqueuses je n'en sais rien... ce qui gêne l'observation des plaques intercoxales! que faire pour éviter cela?
Mes acariens ont été tué dans l'éthanol 70% et ont ensuite passé 5 ou 6 jours dans l'acide lactique à 40% (dilué dans l'eau). La photo montrée précédemment a été prise 1 semaine après montage PVLP, je constate qu'il y a moins de bulles que juste après le montage, mais il en reste tout de même beaucoup!

Quels sont vos conseils?

[leopold76]

Bonjour,
C'est pas mal !
C'est un problème de nettoyage il faudrait les passer à la potasse pour éliminer cette "huile".
Cordialement

EDIT : Je voulais juste ajouter que le PVLP comme tu as pu t'en rendre compte éclairci lui aussi